中国粉体网讯 水包油型疫苗佐剂是一种乳液，其中含有分散在水相中的油滴，它们可以诱导对各种抗原的强烈且持久的体液和细胞反应。然而，它们也需要特殊的方法来制备稳定和有效的乳液。其中一种方法是使用高压均质机，这是一种可以通过施加高压力和高剪切力来减小乳滴大小、提高均匀性的设备。在本文中，我们将介绍如何使用高压均质机制备水包油型疫苗佐剂。
材料和设备
要使用高压均质机制备水包油型疫苗佐剂，你需要以下材料和设备：
油相：油的选择取决于乳液的所需性质，如粘度、稳定性、免疫原性和安全性。可以使用的油有矿物油、植物油、角鲨烯或其他生物相容性的油，诺华制药的MF59所采用的为角鲨烯。
水相：水的选择取决于与抗原和佐剂的相容性。可以使用的水有盐水溶液、缓冲溶液或抗原溶液，诺华的MF59所使用的为柠檬酸钠缓冲液。
乳化剂：这是一种可以降低油水相之间的界面张力并稳定乳液的物质。乳化剂的选择取决于所用油水类型和乳液的所需特性，如液滴大小、电荷、分布和稳定性等。可以使用的乳化剂有聚山梨酯（如吐温80）、磷脂（如卵磷脂）或其他具有生物相容性和无毒性的表面活性剂。
高压均质机：这是一种可以产生高压力和高剪切力来将油滴处理得更小、使其更均一的设备。均质机的选择取决于工作压力范围、流量、温度控制和清洁等选项。
目前市面上可选择的均质机有以ATS为首的阀式均质机和以MFIC为首的微射流均质机等。
操作步骤
要使用高压均质机制备油包水型疫苗佐剂，你可以按照以下步骤操作（此操作为诺华MF59制备步骤）：
Step 1：将乳化剂Span85分散在角鲨烯中，Tween80分散在柠檬酸钠缓冲液中，制备油相和水相；
Step 2：将油相和水相混合，使用高速剪切机以10rpm的转速持续剪切制得初乳；
Step 3：将初乳转移至高压均质机进料容器处，根据期望的乳滴粒径和分布调节压力设置后开始均质。
Step 4：将乳液从均质机的出口收集到无菌容器中。使用适当的方法检查乳液的外观、粘度、pH、粒径和分布。如果需要，重复步骤3和4以达到最佳效果。
Step 5：通过过滤、热处理或辐照对乳液进行灭菌，以去除任何微生物污染。确保灭菌方法不会影响乳液的质量或完整性。
Step 6：将乳液储存在密封容器中，温度适宜，以防止相降解或分离。定期检查乳液的物理和化学特性，如pH、粘度、乳滴大小等。
注意点和会遇到的问题
要使用高压均质机制备水包油疫苗佐剂，应注意以下几个点和会遇到的问题：
注意点 1：仔细选择油、水、乳化剂和佐剂成分，以确保乳液的相容性和稳定性。避免使用可能导致抗原或佐剂沉淀、聚集、氧化、水解或降解的成分。
注意点 2：调整油与水的比例和乳化剂的浓度，以达到所需的液滴尺寸和分布。通常，较高的油水比和较低的乳化剂浓度会导致液滴更大、更不均匀。较低的油水比和较高的乳化剂浓度导致液滴更小、更均匀。
注意点 3：调整均质机的压力和流速，以达到所需的液滴尺寸和分布。通常，较高的压力和较低的流速会导致更小、更均匀的液滴。较低的压力和较高的流速会导致液滴更大且更不均匀。
问题 1：如果乳液不稳定或分离成相，您可能需要增加乳化剂的浓度、使用不同类型的乳化剂或重复均质过程。您可能还需要检查相的温度、pH或粘度，并在必要时进行调整。
问题 2：如果乳液太粘稠或难以泵送，您可能需要降低油的浓度，使用不同类型的油，或者加热或冷却相以降低其粘度。
结 语
水包油疫苗佐剂是可以增强抗原免疫应答的乳剂。它们可以通过混合含有佐剂和乳化剂的油相和水相来用高压均质机制备，但制备过程需要仔细选择和优化材料和设备，以确保乳液的稳定性和功效。通过遵循这些步骤和需要注意的点，您可以使用高压均质机完美制备水包油疫苗佐剂，用于您的疫苗研究或开发。
（中国粉体网编辑整理/青黎）
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